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微生物的利用

來源:網絡資源 2009-10-10 22:59:12

[標簽:生物]

  "微生物的利用"包括"進行微生物的分離和培養"、"測定某種微生物的數量"、"研究培養基對微生物的選擇作用"和"嘗試利用微生物進行發酵來生產特定的產物"四項具體內容標準,按照相關內容標準的要求,結合人教版教材所對應的實驗課題,本文將談談對本專題的教學組織。

  1習得微生物培養的基礎知識和基本技能

  本專題涉及三個實驗課題,它們的關系及學習要求如下圖所示。在下圖中,課題1涉及微生物培養的基礎知識和基本的操作技能,是其他兩個課題的基礎,課題2和課題3涉及特定的微生物的分離、計數和鑒定,難度較大,課題2強調選擇性培養基的配制和作用,課題3是在選擇性培養基的基礎上,又相應地增加了鑒別性培養基的知識及其應用。

  1.1配制微生物培養基配制培養基的基礎知識是培養、觀察和研究微生物的基礎。教學時,可以先展示有菌落生長的培養基平板,給學生以視覺刺激,讓他們體會到要觀察和研究微生物,必須創設一定的條件讓微生物大量快速地繁殖起來,只有形成具有一定特征的菌落,才能更好地研究微生物。進而向學生提供幾種微生物培養基的配方,讓學生通過比較分析各種配養基配方,明確微生物培養基的基本成分包括:碳源、氮源、無機鹽和水,有些微生物還需要某些特殊的生長因子。然后,依次闡明固體、半固體和液體培養基的用途和配制方法,并結合下面的流程圖概述培養基配制的操作步驟:

  組織學生配制微生物培養基時,要向他們講清下列注意事項:(1)溶化瓊脂時要控制火力的大小并不斷攪拌,以免培養基溢出或燒焦;(2)加熱過程中部分水分蒸發,待瓊脂完全溶化后應補加蒸餾水,以保持溶液的濃度;(3)分裝至試管時培養基的高度不要超過試管高度的1/5;(4)一般是培養基先滅菌再倒平板,也可先倒平板,課間再滅菌;(5)冷卻后的平板要倒置,以確保拿放方便,同時避免水分蒸發,以利微生物生長。

  1.2無菌技術操作無菌技術是培養、分離和純化微生物的重要技術手段,也是植物組織培養的關鍵性操作。教學時,要先讓學生正確區分消毒和滅菌這兩個概念,并充分認識無菌操作的重要性;然后,在教師的組織和指導下進行規范、熟練地操作,以便順利完成微生物的培養、分離和純化等實驗。下表是消毒和滅菌的一些常用方法及使用范圍。

  1.2.1接種的方法及作用微生物接種方法有兩種,一是劃線接種,即用接種環劃線將菌體沾在斜面培養基或平板培養基上。微生物的生長和繁殖迅速,一段時間后,就會在培養基表面形成長滿菌落的細線。劃線法的作用是純化微生物,通過劃線將微生物單個地分離,并最終形成標準的菌落;二是涂布接種,即用涂布器將稀釋菌液均勻地涂布在平板上。一個菌體在培養基平板上形成一個菌落,通過統計菌落數可以計算樣品中的菌體數目。

  1.2.2規范實驗操作接種過程的無菌操作是微生物實驗的關鍵環節,右圖為劃線接種的操作示意圖,下表列出劃線接種的基本步驟和說明。教學中,要求學生認真領會無菌接種的技術原理,反復練習操步驟作。通過練習達到熟練程度,并培養嚴謹認真的科學精神和一絲不茍的實驗態度。

  1.3稀釋菌液的意義和操作方法在單位體積的菌體培養液內,含有的微生物個體數目很多。要對微生物進行分離和計數必須將菌液稀釋,只有在稀釋度足夠高的菌液里,聚集的微生物才能分散成單個細胞。一般將菌液稀釋到10-3~10-7時,接種后可能在培養基平板上形成30~300個左右的菌落,統計的菌落數也比較準確可信。

  用移液管和無菌水稀釋微生物菌液是一件要求較高的操作技術,學生需要經過多次練習才能做到盡量地減少誤差。以土壤為樣品進行稀釋操作的注意事項是:(1)初次稱量的土壤樣品,稀釋后的菌液濃度較大,移液時極容易堵塞移液管或吸入較多的土壤顆粒,應靜置一段時間后再移液,或者用低速離心機離心1分鐘后進行移液;(2)當稀釋倍數大時,在稀釋前一定要震蕩試管,充分混合菌液,保證移液操作的準確性;(3)每次移液前一定要注意用無菌水(或蒸餾水)清洗移液管并用氣球吹干,以保證移走菌液的濃度與試管中的一致。

  2.實驗設計能力的訓練

  2.1選擇性培養基的實驗設計根據功能的不同,培養基分為選擇性

  培養基和鑒別性培養基,在"土壤中分解尿素的細菌的分離與計數"的實驗中,先讓學生通過分析和判斷下面的三個培養基配方,真正理解選擇性培養基的含義。然后,啟發學生設計一組用于分離尿素細菌的探究實驗,幫助學生理解選擇性培養基的特性及作用。

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