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三年連考生物知識點:微生物的分離和培養

來源:高考網整理 2019-10-24 08:35:03

  2020年高考即將開戰,你準備好了嗎?對于高中生物成績不好的同學來說,熟悉復習資料的積累要隨時整理。高考網小編為各位考生整理了一些高考生物必備的知識點,供大家參考閱讀!

  一、目的要求

  1、掌握各種分離、接種方法。

  2、掌握無菌操作基本環節。

  二、實驗說明

  微生物在自然界中呈混雜狀態存在,要獲得所需菌種,必需從中把它們分離出來。在保存菌種時不慎受到到污染也需予以分純。微生物分離和純化的方法很多,但基本原理卻是相似的,即將待分離的樣品進行一定的稀釋,并使微生物的細胞(或孢子)盡量以分散狀態存在,然后使其長成一個個純種單菌落。然而上述工作又離不開接種,即將一種微生物移到另一滅過菌的培養基上的過程。

  三、實驗材料

  1、恒溫培養箱。

  2、接種環、玻璃棒、吸管、酒精燈。

  3、培養基(上次實驗配制的)。

  4、大腸桿菌、枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、酵母菌。

  四、方法步驟

  (一)接種的操作

  1、斜面接種(接金黃葡萄球菌)

  (1)操作前,先用75%酒精擦手,待酒精揮發后點燃酒精燈。

  (2)將菌種管和斜面握在左手大姆指和其它四指之間,使斜面和有菌種的一面向上,并處于水平位置。

  (3)先將菌種和斜面的棉塞旋轉一下,以便接種時便于拔出。

  (4)左手拿接種環(如握鋼筆一樣),以火焰上先將環端燒紅滅菌,然后將有可能伸入試管其余部位也過火滅菌。

  (5)用右手的無名指、小指和手掌將菌種管和待接斜面試管的棉花塞或試管帽同時拔出,然后讓試管口緩緩過火滅菌(切勿燒過燙)。

  (6)將灼燒過的接種環伸入菌種管內,接種環在試管內壁或未長菌苔的培養基上接觸一下,讓其充分冷卻,然后輕輕刮取少許菌苔,再從菌種管內抽出接種環。

  (7)迅速將沾有菌種的接種環伸入另一支待接斜面試管。從斜面底部向上作“Z”形來回密集劃線。有時也可用接種針僅在培養基的中央拉一條線來作斜面接種,以便觀察菌種的生長特點。。

  (7)迅速將沾有菌種的接種環伸入另一支待接斜面試管。從斜面底部向上作“Z”形來回密集劃線。有時也可用接種針僅在培養基的中央拉一條線來作斜面接種,以便觀察菌種的生長特點。

  (8)接種完畢后抽出接種環灼燒管口,塞上棉塞。

  (9)將接種環燒紅滅菌。放下接種環,再將棉花塞旋緊。

  2、液體接種

  (1)由斜面培養基接入液體培養基,此法用于觀察細菌的生長特性和生化反應的測定,操作方法與前相同,但使試管口向上斜,以免培養液流出接入菌體后,使接種環和管內壁磨擦幾下以利洗下環上菌體。接種后塞好棉塞將試管在手掌中輕輕敲打,使菌體充分分散。

  (2)由液體培養基接種液體培養基,菌種是液體時,接處除用接種環外尚用無菌吸管或滴管。接種時只需在火焰旁拔出棉塞,將管口通過火焰,用無菌吸管吸取菌液注入培養液內,搖勻即可。

  3、平板接種

  將菌在平板上劃線和涂布。

  (1)劃線接種 見分離劃線法。

  (2)涂布接種 用無菌吸管吸取菌液注入平板后,用滅菌的玻棒在平板表面作均勻涂布。

  4、穿刺接種

  把菌種接種到固體深層培養基中,此法用于嫌氣性細菌接種或為鑒定細菌時觀察生理性能用。

  (1)操作方法與上述相同,但所用的接種針應挺直。

  (2)將接種針自培養基中心刺入,直刺到接近管底,但勿穿透,然后尚原穿刺途徑慢慢拔出。
 

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